Люминесцентная микроскопия

Рис. 1. Люминесцентная микроскопия

В люминесцентной микроскопии препараты обрабатываются специальными реактивами, отдельные молекулы которых обладают способностью на очень короткое время, как правило, доли секунд – поглощать свет, а затем снова испускать его. Этот испускаемый свет имеет смещение по длине волны в сторону длинноволновой области спектра (красный цвет). Так, например, если поглощается синий свет, то сразу после этого испускается зеленый свет. Зеленый свет преобразуется в желтый, желтый – в красно-оранжевый, а невидимое ультрафиолетовое излучение – в видимый свет.

Такое явление носит название "эффект Стокса", по фамилии его открывателя. В люминесценции испускаемый свет имеет длину волны, превышающую длину волны поглощаемого света на 20 – 50 нм. Свет от дополнительного источника света 1 попадает через теплозащитный фильтр 2, запирающий фильтр 3 и полевую диафрагму 4 к возбуждающему фильтру 5. Этот фильтр встроен в рефлекторную задвижку, в которой также расположен дихроичный светоделитель 6. Дихроичный светоделитель отражает коротковолновое возбуждающее излучение через объектив 7 на препарат 8. Испускаемый при этом свет собирается объективом 7 и пропускается дихроичным светоделителем 6, т.к. он обладает большей длиной волны, чем возбуждающий свет. Затем лучи проходят через эмиссионный фильтр 9, где отфильтровывается остаточный возбуждающий свет. Вследствие этого такой фильтр называют запирающим фильтром. Тубусная линза 10 и окуляр 11 формируют микроскопическое изображение, теперь состоящее только из люминесцентного света.